Obrazowanie żywych komórek wymaga mikroskopówktóre minimalizują fototoksyczność, utrzymują żywotność komórek i zapewniają obrazowanie o wysokiej rozdzielczości w czasie. Wspólne wybory obejmują:
1. Odwrócone mikroskopy fluorescencyjne:
Mikroskopy na szerokości pola: wyposażone w kontrolki środowiskowe (temperatura, CO₂, wilgotność) i wrażliwe kamery (np. SCMO). Często w połączeniu z kontrolą fazową lub DIC (kontrast interferencji różnicowej) dla obrazowania bez etykiety.
Spinning Disk Confocal: Zmniejsza fotografowanie z szybszym skanowaniem w porównaniu do tradycyjnego konfokału skanowania laserowego. Idealny do procesów dynamicznych.
2. Mikroskopia fluorescencyjna blachy światła (LSFM):
Oświetla tylko płaszczyznę ogniskową, drastycznie redukując ekspozycję światła i umożliwiając długoterminowe obrazowanie (np. Godzin do dni).
3. Mikroskopia dwufotonowa:
Wykorzystuje światło bliskiej podczerwieni do głębszej penetracji tkanki i zmniejszonej fototoksyczności, odpowiednich do grubych próbek, takich jak kultury 3D.
4. TIRF (całkowita fluorescencja wewnętrzna odbicia):
Wizualizuje wydarzenia wbłona komórkowa(np. Handel pęcherzykiem) poprzez obrazowanie cienkiej (~ 100 nm) sekcji optycznej.
5. Mikroskopy super rozdzielczości (np. STED, SIM):
Osiągnij wyższą rozdzielczość, ale wymaga starannej optymalizacji, aby zrównoważyć ekspozycję światła i zdrowie komórek.
6. Systemy zoptymalizowane na żywo:
Włącz komory środowiskowe, optykę adaptacyjną i detektory o słabym świetle (np. Kamery EM-CCD).
Kluczowe funkcje obrazowania na żywo:
- Kontrola środowiska: utrzymuje temperaturę, co₂ i wilgotność.
- Szybkie akwizycja: Minimalizuje rozmycie ruchu dla procesów dynamicznych.
- Niska fototoksyczność: filtry, źródła światła LED lub oświetlenie arkusza światła zmniejszają uszkodzenie.
Wybierz na podstawie potrzeb związanych z rozdzielczością, czasem trwania obrazowania i czułości próbki.
